蛋白含量檢測試劑盒(BCA法)
原理
在堿性環境下蛋白質分子中多肽鍵結構與Cu2+絡合并將Cu+,Cu+特異性結合成穩定的紫色復合物,該復合物在)
試劑B 30ml (4℃保存)
儀器
酶標儀或分光光度計,工作波長540nm~590nm,*工作波長490nm波長。
適用范圍
不含還原劑的蛋白樣品。
實驗步驟
B按2. 標準品稀釋:用純化水將2mg/ml的1600、400、100、25ug/ml。注意用純化水標記空白。
30分鐘或室溫下靜置4. 在酶標儀或分光光度計上,以562nm波長下,空白管調OD值。
Y軸,標準品濃度為6. 從標準曲線上查找待測樣品濃度,注意稀釋后的樣品所測濃度需乘以稀釋倍數。
說明
20-2000ug/ml,若樣本超過此范圍需再酌情稀釋。
10mM時不可直接使用3. 在37℃孵育2小時對檢測比較便利,但嚴格來講,此時反應尚未達到終點,通常每A562下2.3%,在4. 可測量吸附于固相支持物如酶標版、瓊脂糖、親和層析凝膠上的蛋白。
<span font-size:19px;"="">5. 本法僅適用于科研。