服務熱線 : 86-
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| 產地 | 北京 |
| 品牌 | 生研生物 |
| 純度 | % |
O型口(kou)蹄疫(yi)免疫(yi)抗體檢(jian)測試劑盒試劑(ji)盒(he)全(quan)滴度
使用說明書(shu)
產品名稱
通用名:O型口蹄疫免疫抗(kang)體檢測試劑(ji)盒試劑(ji)盒全滴度
包(bao)裝規格
96T×1/盒
檢(jian)測原(yuan)理
本試(shi)劑(ji)盒由預包被口(kou)蹄疫O型病毒重組蛋(dan)白的酶(mei)標(biao)板、酶(mei)標(biao)記(ji)物及其他配套(tao)試劑組成,應用酶(mei)聯免疫法(ELISA)原理檢測豬、牛、羊血清(qing)或血漿樣本中口蹄疫O型病毒抗體。實(shi)驗時在(zai)酶標板中加入對(dui)照血(xue)清(qing)和待檢樣(yang)本,經溫(wen)育后若樣(yang)品中含有口蹄疫O型病毒抗(kang)體,則將與酶標板上抗(kang)原結(jie)合,經洗滌(di)除去未結(jie)合的(de)其(qi)他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合(he)物(wu)發生特異性(xing)結合(he);再經洗滌(di)除去未結合(he)的(de)酶標(biao)記物(wu),在孔(kong)中加(jia)TMB底物(wu)(wu)液(ye),與酶標結合物(wu)(wu)反應形成藍色(se)產物(wu)(wu),顯色(se)深淺與樣品中的特異性抗體(ti)含量成正相(xiang)關;加入(ru)終止液(ye)終止反應后(hou),產物(wu)(wu)變為黃色(se);用(yong)酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸(xi)光值,即可知樣品是(shi)否含(han)有口蹄疫O型病(bing)毒(du)抗體。
試劑盒(he)組成(cheng)
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序號(hao) |
名稱 |
規格/96T×1 |
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1 |
酶(mei)標記(ji)物(wu) |
12ml×1(紅蓋) |
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2 |
樣品(pin)稀(xi)釋液(ye) |
22ml×1(黃蓋) |
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3 |
20X濃縮(suo)洗(xi)滌液 |
40ml×1(藍蓋) |
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4 |
底物液(ye)A |
6ml×1(白蓋) |
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5 |
底物液B |
6ml×1(黑蓋) |
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6 |
終止液 |
12ml×1(黃蓋) |
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7 |
陽性對照 |
1.0 ml×1(紅蓋(gai)) |
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8 |
陰(yin)性(xing)對(dui)照 |
1.0 ml×1(綠(lv)蓋) |
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9 |
酶標板(ban) |
96T×1 |
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10 |
封板(ban)膜(mo) |
1 |
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11 |
說明書 |
1 |
儲存及有效(xiao)期
2~8℃保存(cun),有(you)效(xiao)期12個月。
包被板(ban)開封后請于2~8℃避光(guang)保存(cun),避免受(shou)潮。使用(yong)期(qi)限為2個月。
適用(yong)儀器
含450nm波長的酶標(biao)儀,37℃恒溫設(she)備,可調微量移液器。
樣(yang)品準(zhun)備(bei)
1.取動物全(quan)血(xue)按常規方法制備血(xue)清(qing)(qing),要求血(xue)清(qing)(qing)清(qing)(qing)亮,無溶(rong)血(xue)、無污染。樣品1周(zhou)內(nei)可(ke)于2~8℃保存,長期需置(zhi)-20℃保存(cun)。
2.根據樣本(ben)數量準備對(dui)應數量的小刻度EP管或血清稀釋盤,用樣品稀釋液將待檢血(xue)清按50倍稀釋(shi)(如4μl血(xue)清加入196μl樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)中(zhong),混勻)陰性、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(ying)恢(hui)復至(zhi)室溫使沉淀(dian)溶解,然后(hou)用蒸(zheng)餾水或去離子水作20倍稀釋成(cheng)工作(zuo)洗滌液(如(ru)19份蒸餾水或(huo)去離子水加1份濃縮洗滌液)。
檢(jian)驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fu)至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性、陽性對照各1孔,未用(yong)的板條盡快(kuai)密封,2~8℃保存(cun)。
3.陰性(xing)、陽性(xing)對(dui)照孔(kong)(kong)(kong)分別加入(ru)(ru)陰性(xing)、陽性(xing)對(dui)照100μl;樣(yang)品(pin)孔(kong)(kong)(kong)每孔(kong)(kong)(kong)加入(ru)(ru)稀釋后的樣(yang)品(pin)100μl。
4.混勻,蓋(gai)好蓋(gai)板(ban)膜,置37℃溫(wen)箱(xiang)孵育30分鐘。
5.甩去孔(kong)內液體,每孔(kong)加250ul工作洗滌液,用震(zhen)蕩(dang)混勻的方(fang)式洗(xi)滌60秒(miao)后棄去(qu),重(zhong)復洗滌(di)(di)5次,每次洗滌(di)(di)后需拍干液體(ti)。
6.每孔加酶標記物100μl,置37℃避(bi)光反應(ying)30分鐘。
7.甩去孔(kong)內液(ye)體,每孔(kong)加250ul工作洗滌液,用(yong)震蕩(dang)混(hun)勻的方式(shi)洗(xi)滌60秒后棄去,重復洗滌5次(ci),每次(ci)洗滌后需拍干液體。
8.根據樣本數量將顯色液A與顯色液B按(an)等體積比例混勻配置為底物工作(zuo)液,現配現用。每孔(kong)加(jia)100ul,置(zhi)37℃避(bi)光反應10分鐘。
9.每(mei)孔(kong)加終(zhong)止液100μl,混(hun)勻,于450nm 測定各(ge)孔吸光值(OD值),
參(can)考(kao)值(zhi)
實驗正常的情況(kuang)下,陽性對照OD-陰性對照(zhao)OD>0.2。
檢驗結果(guo)的解釋
1. S/P=(樣本(ben)OD-陰性對照OD)/(陽(yang)性對照OD-陰性對照(zhao)OD)。
2. S/P≥0.4時結果判(pan)讀(du)為陽性。
3. 0.2<S/P<0.4時結果為(wei)疑似陽性;若接(jie)種過對應疫(yi)(yi)苗,則提示抗體(ti)水平不足,建議補打疫(yi)(yi)苗。
4. S/P<0.2時結果判讀(du)為陰(yin)性(xing)。
試驗方法的(de)局限性(xing)
1. 本試(shi)劑盒(he)僅作為定性檢測豬(zhu)、牛、羊血(xue)清(qing)或血(xue)漿(jiang)中口(kou)蹄疫O型病毒抗體的粗略評估。
2. 本試劑(ji)盒(he)僅(jin)供研(yan)究使用,不得用于臨床實(shi)驗或(huo)人體(ti)實(shi)驗。
注意(yi)事項
1.實驗操作(zuo)(zuo)時需戴(dai)手(shou)套(tao)、穿工(gong)作(zuo)(zuo)衣,嚴格(ge)健全和執行消(xiao)毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳(chuan)染物處理。
2.終止液(ye)具有腐蝕性,應(ying)避免接(jie)觸(chu)皮膚(fu)和衣(yi)物,如不慎接(jie)觸(chu)請立即用大量自來水(shui)沖洗。
3.酶(mei)標板(ban)從(cong)冷藏(zang)環境(jing)中取出時應(ying)恢復至室(shi)溫方可(ke)開袋,未用完的酶(mei)標板(ban)需放入(ru)有(you)干燥劑的密封袋中保(bao)存(cun)。
4.濃縮洗滌液在低溫時(shi)容易結晶(jing),使用時(shi)需(xu)恢復至室溫以完全溶解。
5.洗(xi)滌時各孔(kong)均(jun)需加滿液(ye)體,防止孔(kong)口有(you)游離酶不能洗(xi)凈(jing)。
6.用于檢(jian)測(ce)的樣品應保持新鮮。
7.試驗(yan)結果的(de)判(pan)定(ding)必(bi)須(xu)以(yi)酶標儀讀數為(wei)準。
8.不同批(pi)號試劑組(zu)分(fen)不得混用。
生(sheng)產企業
企業名稱:賽諾(nuo)利康(kang)生物(wu)技術(北京)有限公司
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